Voltammetric Studies on the Interaction of Orange G with Proteins. Analytical Applications

A interação do alaranjado G com proteína foi investigada pela técnica de voltametria. O alaranjado G, em solução tampão Britton-Robinson (B-R), pH 2,0, mostrou um pico voltamétrico irreversível de redução, a –0,17V (vs. SCE) utilizando mercúrio como eletrodo de trabalho. A adição de albumina de soro humano (HSA) à solução de alaranjado G, resultou no decréscimo do pico de corrente de redução, aparentemente sem variações dos portenciais de pico e sem o surgimento de novos picos de corrente. Os parâmetros eletroquímicos da solução de alaranjado G, na ausência e presença de HSA, foram calculados e comparados. Os resultados mostraram que não ocorreram variações significantes, indicando que o comportamento eletroquímico da solução reacional utilizando mercúrio como eletrodo de trabalho não variou e que foi formado um biocomplexo supramolecular, eletroquimicamente inativo. O mecanismo de interação foi devido à formação do campo microeletrostático na estrutura da albumina em solução aquosa, causando a interação com o alaranjado G, o que induziu o decréscimo da concentração de equilíbrio do alaranjado G na solução reacional, e o decréscimo do pico de corrente de redução. As condições de interação foram discutidas cuidadosamente. Sob condições ótimas, o decréscimo do pico de corrente foi proporcional à concentração da proteína e posteriormente, usado para a determinação de diferentes tipos de proteínas. As curvas de calibração para a determinação de HSA, albumina de soro bovino (BSA), ovalbumina (OVA), hemoglobina bovina (BHb) e lipase, foram lineares nos intervalos de 4,0~28,0 mg L, 4,0~30,0 mg L, 2,0~20,0 mg L, 2,0~25,0 mg L e 2,0~30,0 mg L, respectivamente. O limite de detecção foi 3,0 mg L para HSA, 3,5 mg L para BSA, 1,0 mg L para OVA, BHb e lipase. O novo método eletroquímico estabelecido foi aplicado para determinar o teor de albumina em amostras de soro humano sadio e os resultados apresentaram boa concordância com o tradicional método espectrofotométrico Coomassie Brilliant Blue (GBB G-250).